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    多种模式研究叶片气孔活动的应用举例
    日期:2024-12-06 16:21:45

    便携式叶绿素荧光-气孔仪MINI-PAM-II/Porometer是德国WALZ公司新推出的叶绿素荧光和气孔活动同步测量解决方案。通过MINI-PAM-II/Porometer可以实现叶片气孔导度和叶绿素荧光的同步测量,可以用于快速评估PSII光能转换效率和气孔开放程度。作为一款新开发和设计的轻巧紧凑型附件,它非常适合在野外,温室和实验室等多种应用场景下使用。可以广泛应用于快速筛选植物突变株系、高通量评估胁迫因素影响程度。除此之外,它也可以应用于诱导曲线(Induction Curve)或快速光曲线(Light Curve)等经典程序测量,对植物进行细致的淬灭分析和暗弛豫分析。MINI-PAM-Ⅱ/Porometer气孔计可以测量植物叶片水分蒸发和气孔导度精确信息的同时测量叶绿素a荧光,以上两点是描述植物光合活性的两个重要指标。

    MINI-PAM-II/Porometer主要功能
    • 搭载湿度传感器可以测定叶片的H2O蒸发量和环境湿度;
    • 搭载叶片温度传感器可以精确测量叶片温度;
    • 搭载压力传感器可以精确测量环境气压;
    • 配置流量传感器和气泵可以精确控制气体流速,泵工作时非常安静;
    • 搭载光合有效辐射(PAR)传感器,与叶片同一平面,用于精确计算电子传输速率(ETR) 
    • 搭载环境CO2传感器用于实验室或温室条件下监测环境CO2水平;
    • 搭载GPS模块用于在现场应用中跟踪样本和太阳位置,并确定叶片上的太阳入射角;
    • 可测量的参数包括:gs mmol m-2 s-1; gt mmol m-2 s-1; gb mmol m-2 s-1H2Oin mmol mol-1; dH2O mmol mol-1H2Oout mmol mol-1; 叶室压力 kPa; 叶片温度Tleaf ℃; 叶室气流进入/流出速率µmol s-1; 饱和水汽压亏缺VPD Pa/kPa; 蒸腾速率E mmol m-2 s-1; PAR µmol m-2 s-1; GPS定位; 太阳倾角等。
    MINI-PAM-II/Porometer典型应用
    快速评估叶片气孔数据
    MINI-PAM-II/Porometer可提供实验植物叶片的蒸腾速率、VPD 和气孔导度等信息。测量操作简单,在15-30秒的典型采样时间内即可获得准确结果。

    图124120601.jpg

    图1 对不同植物叶片的气孔导度测量记录的数据。
    为了显示典型的测量顺序,使用WinControl-3软件每秒记录一次数据点。
    红圈中的点表示手动测量触发了额外的饱和脉冲分析。
    为优化工作流程,设备可自动执行稳定性判定。然后对气孔导度的变化进行评估,一旦满足稳定性标准,就会自动触发测量。
    稳定性判定标准是预设的,也可根据个人要求进行定制。稳定性标准可应用于两种数据采集类型:仅采集气孔导度数据,饱和脉冲分析和气孔数据同时采集。后者用于对遮荫生长(图2A)和阳光照射(图2B)的皱叶荚蒾叶片进行分析。

    图224120601.jpg

    图2 荫生叶片(A)与阳长的叶片(B)的测量结果对比

    图324120601.jpg

    图3 荫生与阳生叶片的气孔导度(蓝色)和Y(Ⅱ)(绿色)

    上述不同生长环境的叶片在气孔仪参数和叶绿素荧光分析中表现出许多差异。图3显示了气孔导度(gs)和Y(Ⅱ)的结果。对于野外现场测量来说,气孔仪的功能格外实用:它能记录GPS、叶片倾角和每个数据集的入射光矢量,这样就能精确记录样本的地理位置。
    气孔导度和叶绿素荧光程序同步测量
    MINI-PAM-II/Porometer除了单独测量气孔导度外,还可以与MINI-PAM-II的常用测量协议,如诱导曲线(淬灭分析),光曲线等程序同步测量。以此为这些成熟的叶绿素荧光分析流程增加了气体交换的重要辅助数据。例如在光照曲线或诱导曲线期间额外增加蒸腾速率、VPD、气孔导度和气孔运动的测量和记录。图4显示了在蒲公英叶片上测量诱导曲线时的气孔运动情况。

    图424120601.jpg

    Porometer可与红光版或蓝光版MINI-PAM-II型号一起使用。根据型号的不同,可使用红光或蓝光进行光照。如果您的实验需要更多样化的照光条件,可以使用外置LED光源 2054-L,用红光、绿光、蓝光或白光或这四种光质的混合光进行光照并测量。

    图524120601.jpg

    图4 蒲公英叶片诱导曲线
    10%蓝光,10%绿光,10%红光,70%白光
    这是蒲公英两个照光阶段诱导曲线的软件截图,在190 µmol m-2 s-1和380 µmol m-2 s-1条件下,蓝光占 10%,绿光占10%,红光占10%,白光占70%。Y(II)(绿色)、PAR(黄色)、ETR(红色)、NPQ(亮蓝色)和气孔导度(暗蓝色)。Y轴刻度指的是气孔导度,单位为 mmol m-2 s-1
    MINI-PAM-II/Porometer的监测功能应用
    新设计的Clock功能“Yield + Poro Only”可以触发饱和脉冲,然后进行一系列的气孔导度测量。如果您希望获得有关气孔导度的详细信息,但又不太频繁地进行饱和脉冲测量,那么该时钟功能是实现监测目的的理想选择。在独立运行时,只需提供一些额外的电源,带气孔仪的MINI-PAM-II就能对样品进行数天的监测。您可以详细、连续地捕捉PS(II)光合作用和气孔动态及其对环境条件变化的适应性,正如您在以下两个监测实验中看到的那样:
    • 落地生根(Kalanchoe laxiflora)叶片的昼夜监测
    图624120601.jpg

    图5 在4个昼夜的监测中落地生根叶片的气孔导度和ETR

    图724120601.jpg

    图6 气孔仪用于监测落地生根叶片

    该植物在12小时光照(680  µmol m-2 s-1)和12小时黑暗循环下培养。与典型的CAM植物一样,气孔仪在夜间测定气孔开放情况。只要植物得到充足的水分,气孔也会在白天的后半段打开,以维持光合作用的效率。最初浇水充足时,数据清楚地显示前三天后半天气孔开度下降。第四天浇水后,夜间气孔开度与前三天相比明显增加。
    • 在小型玻璃温室内进行的番茄叶片6天连续监测实验

    图824120601.jpg

    图7 对番茄叶片进行为期6天的监测和记录

    气孔导度(蓝色)、PAR(黄色)、CO2(灰色)、ETR(红色)和温度(棕色)。

    在该实验中,每半小时进行一次气孔导度和叶绿素荧光测量,在小型温室内连续监测一片番茄叶片达6天之久。图中显示了在此期间收集到的一些综合数据。日周期测量结果良好,可以看到叶片在全天波动的光照条件下的表现。MINI-PAM-II/Porometer可以同时记录环境参数,如温室内的二氧化碳浓度。灰色显示的是温室内的二氧化碳浓度。二氧化碳浓度波动很大,白天的峰值浓度超过750 ppm。
    相关的实验数据与M.A.Caird等人(Funct Plant Biol. 2007 Apr;34(3):172-177. doi: 10.1071/FP06264)的研究结果一致,本实验中测得的番茄叶没有完全闭合气孔,并且在整个夜间显示出明显的蒸腾水分流失。
    以上就是便携式叶绿素荧光-气孔仪MINI-PAM-II/Porometer的一些经典应用,可以单独测量气孔导度,可以进行气孔导度和叶绿素荧光程序同步测量,可以监测植物气孔运动的昼夜节律,可以长期连续监测植物叶片气孔动态变化,进行植物气孔活动与环境变化的适应性研究。如果您对上述应用和研究感兴趣,不妨进一步了解MINI-PAM-II/Porometer ,体验气孔活动和叶绿素荧光研究的精确性和灵活性。
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